Une étude prospective et comparative de la réponse immunitaire au vaccin antigrippal inactivé chez les patients transplantés hépatiques pédiatriques et leurs frères et sœurs en santé

Contexte La vaccination annuelle contre la grippe est systématiquement recommandée pour les receveurs pédiatriques d’organes solides. Cependant, il existe peu de données définissant la réponse immunitaire au vaccin inactivé dans cette population. Méthodologie Cette étude prospective a comparé les réponses immunitaires humorales et à médiation cellulaire au vaccin subvirion trivalent en pédiatrie. Tous les sujets ont reçu un vaccin antigrippal inactivé. L’inhibition de l’hémagglutination et les épreuves immuno-enzymatiques IFN-γ de l’interféron-γ pour les souches de Nouvelle-Calédonie et de Shanghai ont été réalisées au départ, après chaque dose de vaccin, et plusieurs mois après la vaccination. La seroconversion en série a été définie comme une multiplication par le nombre de titres d’anticorps; La séroprotection a été définie comme un titre d’anticorps ⩾: Une augmentation du nombre de lymphocytes T sécrétant l’IFN-γ a été considérée comme une réponse positive aux immunosorbants localisés. Résultats Après vaccination, les receveurs de greffe ont obtenu des taux de séroconversion et de séroconversion similaires Toutefois, pour les deux souches grippales, les réponses IFN-γ par immuno-enzymatique ont été significativement atténuées chez les receveurs de transplantation après des doses de vaccin. Aucun cas de grippe ou d’événement indésirable grave lié au vaccin n’a été documenté dans l’étude. La diminution de la réponse immunitaire à médiation cellulaire à la vaccination antigrippale observée chez les transplantés hépatiques pédiatriques suggère que la stratégie vaccinale actuelle pourrait ne pas offrir une protection optimale leptospirose. En raison des préoccupations concernant l’émergence potentielle de souches grippales plus virulentes, d’autres études sont nécessaires pour déterminer si Les réponses γ sont prédictives d’efficacité et d’identifier la stratégie de vaccination optimale pour protéger les populations à haut risque d’infection

Les récentes flambées de syndrome respiratoire aigu sévère et de grippe aviaire exigent des stratégies optimales pour protéger la société contre les maladies respiratoires pandémiques La population de receveurs de transplantation d’organes est particulièrement préoccupante. Ces personnes courent un risque élevé de morbidité et de mortalité secondaire à la grippe. La réponse immunitaire à la vaccination est mal comprise Les transplantés pédiatriques sont peut-être les plus vulnérables, car même les enfants immunocompétents sont susceptibles de souffrir d’une grave grippe Au moment de la transplantation, les nourrissons et les jeunes enfants sont rarement exposés à la grippe. amorçage immunologique protecteur Les receveurs pédiatriques d’organes pleins courent un risque de complications liées à la grippe, y compris la pneumonie, la septicémie, la maladie du SNC, le rejet aigu du greffon et la mort , patients avec infl Les receveurs de greffe de foie représentent une proportion croissante de la population de receveurs de greffe pédiatrique. La façon dont ces enfants réagissent aux vaccinations, y compris le vaccin inactivé trivalent contre la grippe sous-virale, est mal comprise. Évaluations de la grippe inactivée le vaccin dans d’autres populations immunodéprimées, comme les enfants infectés par le VIH et le cancer, suggère une diminution de la réponse vaccinale par rapport aux enfants immunocompétents Cependant, les données concernant la réponse immunitaire chez les transplantés d’organes pédiatriques sont moins importantes. ont donné des résultats contradictoires, certains auteurs suggérant une diminution de la réponse anticorps à la vaccination La production d’anticorps sériques après la vaccination antigrippale est cruciale pour la protection contre la maladie et est un corrélat important pour l’efficacité vaccinale a et la prévention des complications associées à la grippe nécessitent également une réponse immunitaire à médiation cellulaire vigoureuse Les lymphocytes T CD spécifiques de l’influenza interviennent dans la destruction des cellules hôtes infectées et régulent à la hausse les cytokines pro-inflammatoires dans les modèles animaux Les cellules T cytotoxiques peuvent démontrer une réactivité croisée lorsqu’elles répondent à de nouveaux sous-types du virus grippal A L’influenza chez les nourrissons stimule la prolifération des lymphocytes T cytotoxiques, bien que le degré de cette prolifération soit plus faible que celui des lymphocytes T cytotoxiques. Après la vaccination, la réponse anticorps secondaire nécessite l’expansion des lymphocytes T CD mémoire et l’assistance des cellules T CD Bien que de petites études impliquant à la fois des receveurs de greffe de cellules souches hématopoïétiques pédiatriques et des organes adultes solides les receveurs de greffe suggèrent une diminution de la réponse des cellules T à inacti Nous présentons les résultats d’un seul centre, évaluation comparative prospective des réponses immunitaires humorales et à médiation cellulaire au vaccin antigrippal inactivé chez des patients transplantés d’organes solides pédiatriques. receveurs de transplantation hépatique pédiatrique et leurs frères et sœurs en bonne santé

Patients, matériaux et méthodes

Vaccin Vaccin vaccin trivalent trivalent contre la grippe sous-virale Fluzone; Sanofi Pasteur a été fourni pour les saisons grippales et les souches virales HN incluses dans le vaccin différaient selon les saisons Les souches virales HN et B A / Nouvelle-Calédonie // Le virus analogue à [HN] et le virus similaire à B / Shanghai // sont restés Le consentement éclairé écrit a été obtenu des parents ou des tuteurs de tous les sujets, et le consentement du sujet a été obtenu le cas échéant Le protocole de l’étude a été approuvé par la Division de la microbiologie et des maladies infectieuses des National Institutes of Health et par le Mount Conseil d’examen institutionnel de l’École de médecine du Sinaï L’essai comprenait les bras d’étude suivants: receveurs de greffe de foie pédiatrique n = et leurs frères et soeurs sains n = Les frères et soeurs en bonne santé ont été choisis comme groupe de contrôle un ménage Les sujets étaient admissibles à l’inscription s’ils étaient soit un receveur de greffe du foie, soit un frère ou une soeur Les critères d’exclusion étaient les suivants: vaccination antérieure avec un vaccin antigrippal pour la saison grippale, réaction d’hypersensibilité connue au vaccin antigrippal inactivé ou au composant du vaccin, y compris les œufs ou les ovules. gélatine, antécédents de syndrome de Guillain-Barré, administration d’immunoglobulines de cytomégalovirus ou d’immunoglobulines contre le varicelle et le zona dans les mois suivant la vaccination et réception de tout vaccin viral vivant en quelques semaines ou de tout vaccin viral inactivé dans les semaines suivant l’enrôlement. ont été vaccinés conformément aux recommandations du Comité consultatif sur les pratiques de vaccination des Centres de contrôle et de prévention des maladies Tous les receveurs de greffe de foie recevaient des doses intramusculaires de vaccin, séparées par semaines. n’avait pas d’antécédents de vaccination antigrippale. Frères et sœurs qui ont été vaccinés contre la grippe au cours des saisons précédentes ou qui l’ont été. Les parents ou les tuteurs ont reçu un journal des symptômes et les réactions vaccinales enregistrées pendant les jours suivant la vaccination, y compris la douleur ou la rougeur au point d’injection, la fièvre, le malaise, la myalgie, la céphalée Les sujets ont été observés pendant des mois après la vaccination et ont été évalués pour le développement de la maladie grippale, le rejet aigu d’allogreffe, la maladie d’Epstein-Barr et / ou la virémie, la maladie de CMV et / ou la virémie ou le changement de médicaments immunosuppresseurs. Des dosages ELISPOT immuno-enzymatiques IFN-γ ont été obtenus au départ avant la vaccination et quelques semaines après chaque dose de vaccin. Les PBMC et les échantillons de sérum ont été recueillis par purification ficoll et congelés à-° C jusqu’au moment de l’analyse. stimulation de la phytohémagglutinine, qui a été menée parallèlement aux dosages ELISPOT. les cellules ont été jugées non viables; ce sujet a été exclu de l ‘analyse ELISPOT La réponse immunitaire tumorale a été évaluée en réalisant des tests d’ anticorps HI pour les composants de la souche A / New Caledonia // HN et B / Shanghai // – du vaccin par technique de microtitrage La réponse immunitaire à médiation cellulaire a été mesurée par le test ELISPOT IFN-γ Pierce Biotechnology, avec une réponse positive représentée par une augmentation du nombre de lymphocytes T sécrétant l’IFN. -γ en réponse aux souches de Nouvelle Calédonie ou de Shanghai Analyse des données et considérations statistiques Les sujets recrutés dans les bras d’essai ont été comparés en fonction de l’âge, de la race et du sexe selon le test exact de Fisher. réponse au départ, après la dose de vaccin, et après les doses de vaccin ELISPOT résultats pour chaque souche virale ont été analysés par la transformation de log pour ajuster pour non-Gauss Les valeurs moyennes d’ELISPOT pour les receveurs de greffe et leurs frères et soeurs ont ensuite été comparées par des tests t de Student indépendants de l’échantillon au départ, après la dose de vaccin et après des doses de vaccin. la valeur moyenne d’ELISPOT au départ avec celle après la première dose de vaccin, ainsi que la valeur moyenne d’ELISPOT après la première dose avec celle après la deuxième dose de vaccin. Une analyse parallèle a été réalisée pour des frères et soeurs sains. si les réponses d’anticorps HI ou les résultats d’ELISPOT sont en corrélation avec l’âge, le temps écoulé depuis la transplantation, le nombre de lymphocytes T ou la dose de médicament immunosuppresseur

Résultats

Trente-et-un transplantés hépatiques pédiatriques et frères et soeurs ont été inclus dans l’étude Trente greffés et frères et soeurs ont terminé l’étude et ont été inclus dans l’analyse finale Les données démographiques sont présentées dans le tableau Les receveurs de greffe de foie étaient similaires à leurs frères et soeurs en bonne santé. , Nombre de lymphocytes T CD et nombre total de lymphocytes T Il y avait significativement plus de femmes dans le groupe des transplantés que dans le groupe des frères et sœurs en bonne santé P = Pour les transplantés, la durée moyenne de la transplantation était de mois, mois Les receveurs de greffe ont reçu un traitement immunosuppresseur à faible dose et un niveau moyen de tacrolimus ± SD de ± ng / mL pendant la durée de l’étude Vingt-six receveurs ont reçu un traitement au tacrolimus, un traitement au mycophénolate mofétil, un traitement à la cyclosporine et un traitement à l’azathioprine , et a reçu un traitement par la prednisone avec une prednisone moyenne Quinze sujets ont subi une transplantation secondaire à une atrésie des voies biliaires extra-hépatiques, une greffe secondaire à une insuffisance hépatique fulminante, une transplantation secondaire à une polykystose rénale autosomique récessive et une transplantation secondaire à d’autres causes.

Réponses d’anticorps détectées par le test des anticorps d’inhibition de l’hémagglutination Les titres d’anticorps de référence pour les souches de Nouvelle-Calédonie et de Shanghai étaient significativement plus faibles chez les transplantés que chez leurs frères et sœurs en bonne santé P = et P = , respectivement figure A et figure B Seul un% des receveurs de greffe a montré des titres d’anticorps séroprotecteurs ⩾: pour la souche de Nouvelle-Calédonie avant la première dose de vaccin, figure A; Près de% ont commencé l’étude avec des titres séroprotecteurs pour la souche B de Shanghai Presque% des frères et soeurs en bonne santé ont commencé l’étude avec des titres séroprotecteurs pour les deux souches virales. Cette anomalie s’est résolue après réception de la première dose de vaccin. titres pour les deux souches Aucune différence statistiquement significative n’a été notée dans les taux de séroprotection entre les receveurs de transplantation et leurs frères et sœurs en bonne santé après la réception de la dose de vaccin P =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie; P =, pour la souche de Shanghai La réception d’une deuxième dose de vaccin n’a entraîné aucune augmentation statistiquement significative des taux d’anticorps séroprotecteurs chez les receveurs de greffe ou les frères et sœurs en bonne santé

Figure Vue largeToile de téléchargementPourcentage des receveurs de greffe et de leurs frères et soeurs sains ayant des titres d’anticorps sériques d’inhibition de l’hémagglutination sérique séroprotectrice ⩾: aux souches de virus grippal A et B de Nouvelle-Calédonie A avant vaccination, après réception de la dose de vaccin et après vaccin * Différence statistiquement significative des taux de séroprotection entre les receveurs de transplantation et leurs frères et soeurs P =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie; P =, pour la souche de Shanghai View largeDownload slidePourcentage des receveurs de greffe et de leurs frères et soeurs en bonne santé avec des titres d’anticorps sériques d’inhibition de l’hémagglutination sérique séroprotecteur to: aux souches de virus grippaux A et B de Nouvelle-Calédonie A avant vaccination, après réception de la dose de vaccin, et après réception de doses de vaccin * Différence statistiquement significative des taux de séroprotection entre les receveurs de greffe et leurs frères et soeurs P =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie; P =, pour la souche de ShanghaiPrès de% de frères et soeurs en bonne santé atteints de séroconversion, définie comme une augmentation des titres d’anticorps, après réception de la dose de vaccin Moins de% des receveurs ont obtenu une séroconversion à la souche de Nouvelle Calédonie ou de Shanghai. dose de vaccin Cette tendance n’était pas statistiquement significative lorsque le taux de séroconversion chez les receveurs de greffe a été comparé à celui de fratries saines P =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie; P =, pour la souche de Shanghai La réception d’une seconde dose de vaccin n’a pas augmenté le taux de séroconversion dans les deux groupes de réponses immunitaires médiées par Cell, comme mesuré par IFN-γ ELISPOT, les réponses IFN-γ, mesurées par ELISPOT, ont été atténuées les souches virales chez les receveurs de greffe figures A et B Avant la vaccination, les receveurs de greffe et les frères et soeurs avaient des réponses ELISPOT similaires de & lt; unités formant des spots par PBMC P =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie; P =, pour la souche de Shanghai, les réponses ELISPOT chez les frères et soeurs ont augmenté pour atteindre des unités de formation ponctuelle par PBMC après réception de la dose de vaccin. Les receveurs de transplant ont présenté une réponse significativement diminuée, avec une augmentation de la valeur moyenne des PBMCs seulement. =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie; P =, pour la souche de Shanghai La réception d’une seconde dose de vaccin n’a entraîné aucun changement statistiquement significatif dans les réponses ELISPOT dans les deux groupes, et les valeurs ELISPOT après la seconde dose sont restées plus faibles chez les receveurs de transplantation que chez leurs frères et soeurs. souche; P =, pour la souche de Shanghai

Figure View largeTélécharger la lameMesures ELISPOT immuno-enzymatiques en réponse aux souches de virus de la grippe de Nouvelle-Calédonie A et de Shanghai B avant la vaccination, après la dose de vaccin et après les doses de vaccin chez les receveurs de transplantation et leurs frères et soeurs sains. unité de formation * Différence statistiquement significative dans les réponses entre les receveurs de transplantation et leurs frères et soeurs P =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie après réception des deux doses et des doses de vaccin; P =, pour la souche de Shanghai après réception de la dose de vaccin; ELISPOT en réponse aux souches de virus de la grippe de Nouvelle-Calédonie A et de Shanghai B au début de la vaccination, après la dose de vaccin, et après l’administration de doses de vaccin * chez les receveurs de greffe et leurs frères et soeurs sains SFU, unité de formation ponctuelle * Différence statistiquement significative dans les réponses entre les receveurs de transplantation et leurs frères et sœurs P =, pour la souche de Nouvelle-Calédonie après réception des deux et doses de vaccin; P =, pour la souche de Shanghai après réception de la dose de vaccin; P =, pour la souche de Shanghai après réception des doses de vaccinCorrélation des réponses immunitaires avec les paramètres cliniques L’objectif secondaire de cette étude était de corréler la réponse immunitaire avec les paramètres cliniques, y compris l’âge, le nombre de lymphocytes T CD, le nombre total de lymphocytes T et degré d’immunosuppression Évaluation par corrélation de rang de Spearman n’a révélé aucune corrélation statistiquement significative entre le titre d’anticorps HI ou la réponse ELISPOT et l’âge, le nombre de lymphocytes T CD ou le nombre total de lymphocytes T Important: les réponses anticorps n’étaient pas prédictives des résultats ELISPOT Temps de transplantation, tacrolimus moyen Cependant, de nombreux sujets avaient subi une transplantation au moins une année avant l’étude et avaient reçu des doses immunosuppressives à relativement faible dose.Un% des receveurs ayant reçu des titres d’anticorps non protecteurs temps d’inscription n’a pas connu séroconversio n à la souche à laquelle ils étaient sensibles; De plus, d’autres greffés ayant participé à l’étude avec des titres séroprotecteurs n’ont pas connu de séroconversion. Ceci contraste avec la majorité des frères et soeurs en bonne santé qui ont eu une séroconversion, même dans le contexte des titres séroprotecteurs au moment de l’enrôlement. Parmi les participants qui n’ont pas eu de séroconversion, des complications ont été observées au cours de la période d’étude, y compris la virémie n =, la maladie à CMV ou virémie n = et le rejet aigu d’allogreffe n = Tableau Six sujets ont reçu un immunosuppresseur sans tacrolimus En revanche, aucun épisode de rejet aigu d’allogreffe n’a été observé chez les receveurs ayant subi une séroconversion P =, et seuls ces sujets ont reçu un traitement immunosuppresseur sans tacrolimus P = Il y a eu des cas de complication du virus d’Epstein-Barr et / ou CMV parmi les participants ayant subi une séroconversion, qui n’était pas différemment du taux chez les sujets qui n’ont pas eu de séroconversion P =

Tableau View largeDownload slideComplications observées chez les sujets ayant présenté une séroconversion aux souches virales testées, comparés à ceux chez les sujets n’ayant pas présenté de séroconversionTable View largeTéléchargement de diapositivesComplications observées chez des sujets ayant présenté une séroconversion aux souches virales testées par rapport à ceux n’ayant pas subi de séroconversion séroconversion Manifestations indésirables Aucun des receveurs de greffe ou de leurs frères et sœurs n’a présenté d’infection grippale documentée au cours de l’étude et aucun événement indésirable grave n’a été rapporté à la vaccination. Aucun des sujets n’a été retiré de l’étude en raison d’événements indésirables liés au vaccin. les receveurs de greffe ont été hospitalisés pendant la période de suivi de mois; ont été hospitalisés en raison d’une exacerbation de l’hépatite auto-immune et ont été hospitalisés en raison de maladies fébriles aiguës, y compris la gastro-entérite et la pneumonie non grippale. Les cas de rejet d’allogreffe et d’hépatite moins de semaines après la vaccination Les résultats des tests d’immunofluorescence directe et de la culture virale pour la grippe étaient négatifs pour tous les enfants évalués pour des maladies respiratoires

Discussion

Les études supplémentaires sont nécessaires pour clarifier l’association entre l’âge et l’immunogénicité du vaccin, en particulier chez les populations immunodéprimées, et pour déterminer si une deuxième dose de rappel est bénéfique chez les receveurs de transplantation. L’augmentation statistiquement significative du taux de rejet aigu d’allogreffe au cours de la période étudiée et la tendance à l’utilisation accrue de traitements immunosuppresseurs sans tacrolimus dans ce groupe suggèrent que la séroconversion n’a pas été confirmée. Les épisodes de rejet aigu d’allogreffe ont été traités avec de la méthylprednisolone mg / kg / jour pendant des jours et avec une augmentation de la dose de traitement Les taux de virus d’Epstein-Barr et de virémie CMV chez les sujets n’ayant pas présenté de séroconversion n’ont pas atteint la signification statistique, mais la tendance observée pourrait être liée à l’immunosuppression induite par le virus et le médicament. Le vaccin antigrippal pourrait également identifier les enfants susceptibles d’avoir besoin d’une prophylaxie antivirale dans le cadre d’épidémies de grippe. Cette cohorte vulnérable pourrait également bénéficier de nouvelles stratégies vaccinales. Quatre receveurs de greffe ont développé un rejet d’allogreffon aigu confirmé par biopsie Le taux de rejet d’allogreffe dans cette cohorte est cohérent avec les taux nationaux de rejet aigu d’allogreffe pendant les premières années après la transplantation Une petite étude impliquant des receveurs de transplantation cardiaque adultes vaccinés et des sujets témoins a suggéré un risque accru de réversibilité histologique de bas niveau. suivi du rejet de l’allogreffe La vaccination antigrippale inactivée , mais une étude plus large impliquant des transplantés hépatiques adultes n’a identifié aucune association entre vaccination antigrippale inactivée et rejet aigu d’allogreffe ou taux élevé de transaminases asymptomatiques Aucune étude pédiatrique n’a évalué de manière approfondie la relation entre la vaccination et le rejet d’allogreffe. Les preuves suggèrent que le risque de rejet d’allogreffe suite à une infection grippale aiguë l’emporte sur le risque théorique de rejet d’allogreffe en réponse à la vaccination. Le taux de rejet aigu d’allogreffes approché% dans une revue impliquant des receveurs adultes de greffes d’organes solides infectés par le virus de la grippe , et le rejet d’allogreffe médiée par la grippe était une cause bien documentée de mortalité dans les séries pédiatriques L’infection par le virus grippal peut induire Le rejet de llograft par la régulation positive des cytokines inflammatoires et des chimiokines, y compris IL-, TNF, IL- et IL-, conduisant à l’activation des mécanismes immunitaires qui aboutissent au rejet cellulaire Le petit nombre de sujets dans notre étude pilote, l’exclusion de La plupart des sujets inclus dans notre étude avaient subi une transplantation au moins des mois avant l’étude et, par conséquent, étaient au-delà de la période de risque le plus élevé pour l’allogreffe. En outre, la signification clinique d’une réponse ELISPOT diminuée n’est pas claire, car peu de données documentent la réponse ELISPOT au vaccin antigrippal dans une population saine. Contrairement aux tests HI dans lesquels les réponses séroprotectrices sont bien définies, aucune valeur ELISPOT établie ou changement de pli à partir de la ligne de base a été démontré comme prédictif de la réponse immunitaire à médiation cellulaire à la grippeLes réponses immunitaires à médiation cellulaire Dans cette étude, les receveurs de greffe comparés à leurs frères et sœurs en bonne santé soutiennent la nécessité d’études plus approfondies et approfondies de l’immunogénicité du vaccin antigrippal inactivé dans cette population. Il est crucial que les futures études incluent les enfants les plus vulnérables, y compris les nourrissons et les greffés. première année après la transplantation Idéalement, les études immunologiques plus sophistiquées serviraient à élucider le phénotype des lymphocytes T spécifiques à la grippe après la vaccination Des études plus approfondies et plus détaillées pourraient fournir les données nécessaires pour définir une réponse immunitaire à médiation cellulaire véritablement efficace contre le vaccin antigrippal Déterminer les paramètres qui prédisent une réponse efficace et sûre au vaccin antigrippal pourrait mener à des stratégies plus efficaces de protection des hôtes immunodéprimés contre les pandémies de grippe et les pathologies émergentes. gens

Remerciements

Nous remercions le Dr Adolfo Garcia-Sastre pour son don généreux de souches de virus grippal spécifiques au vaccin, et le Dr James Godbold pour son aide dans l’analyse statistique. Soutien financier Centre de Biodefense Nord-Est U AI-Lipkin et Instituts nationaux de santé U Conflits d’intérêts potentiels Tous auteurs: pas de conflits