Tests sérologiques pour l’infection par le virus de l’herpès simplex HSV et HSV

Les tests sérologiques pour le virus de l’herpès simplex HSV qui peuvent distinguer avec précision HSV- et HSV- sont maintenant disponibles dans le commerce Ces tests détectent les anticorps contre les glycoprotéines HSV G- et G-, qui évoquent une réponse anticorps spécifique du type Focus Technologies produit le HerpeSelect- et HerpeSelect – les tests de dosage immuno-enzymatique et les tests HSV- et HSV- HerpeSelect / Immunoblot Diagnology ont commercialisé POCkit-HSV-, un test au point de service pour HSV- qui permet de tester le sang d’un stick en clinique. peut être utilisé pour confirmer un diagnostic d’herpès génital, établir un diagnostic d’infection à HSV chez les patients présentant des plaintes atypiques, identifier les porteurs asymptomatiques et identifier les personnes à risque d’acquérir HSV Les paramètres potentiels pour l’utilisation de ces tests comprennent les cliniques de maladies sexuellement transmissibles, les cliniques prénatales et cliniques qui soignent les patients infectés par le virus de l’immunodéficience humaine L’intérêt du patient pour les tests sérologiques HSV semble élevé

La plupart des personnes infectées par le virus de l’herpès simplex ont une maladie méconnue Malgré l’évolution relativement bénigne de leur infection, ces personnes présentent toujours un risque de transmission à leurs partenaires sexuels Les femmes enceintes présentant des infections génitales à HSV non reconnues présentent un risque de transmission. leurs nouveau-nés Même les personnes ayant des plaintes cliniques liées à l’infection par le VHS restent souvent non diagnostiquées car leurs présentations sont «atypiques» et les tests de laboratoire de confirmation largement utilisés ont des taux élevés de faux négatifs. L’herpès est à la traîne du développement d’outils diagnostiques pour d’autres infections caractérisées par une forte proportion d’individus asymptomatiques tels que la syphilis, la chlamydia et le VIH. Des tests moléculaires pour Chlamydia trachomatis et des tests d’anticorps sensibles et spécifiques pour le VIH dans les essais cliniques à la disponibilité commerciale et l’application en pratique clinique ou de santé publique En revanche, malgré le développement dans les laboratoires de recherche des tests sérologiques spécifiques au HSV il y a plus de dix ans , l’adaptation de ces tests à un format commercialisable a été lente et leur utilisation clinique limitée. Ces dernières années, la Food and Drug Administration a approuvé des sérologies spécifiques du HSV, qui sont maintenant disponibles sur le marché. D’autres tests sont en cours de développement. Le prochain défi consistera à appliquer ces tests aux populations appropriées pour un bénéfice clinique et de santé publique. base de l’élaboration de sérologies spécifiques du VHS et du VHS, discute de l’interprétation clinique des résultats des tests et résume les situations dans lesquelles l’utilisation de tels tests peut être bénéfique

Diagnostic sérologique du HSV et du HSV

Les tests d’anticorps basés sur la glycoprotéine G HSV- et HSV- partagent la majorité de leurs séquences immunogènes Cette réactivité croisée conduit à des anticorps qui réagissent avec une efficacité presque égale aux deux sous-types de HSV indépendamment du fait qu’une infection HSV ou HSV ait déclenché la réponse [ ,] Une protéine structurelle, la glycoprotéine G gG- dans HSV- et gG- dans HSV-, semble susciter une réponse prédominante spécifique au type Les epitopes immunodominants humains sur HSV- sont largement distribués à travers la protéine Les epitopes les plus réactifs sur HSV – la glycoprotéine G semble résider dans les portions homologues de la protéine mais, dans les tests avec sérums humains, fixer les anticorps uniquement chez les patients infectés par le VHS. Plusieurs laboratoires de recherche ou de référence ont développé des tests basés sur la reconnaissance des anticorps anti-gG- ou gG – Western blot est une alternative qui, lorsqu’elle est effectuée correctement, est précise pour la détection des anticorps HSV et HSV [,,] D’autres formats dépendent de gG- et gG- qui ont été affin purifié à partir de mélanges protéiques cellulaires infectés par l’utilisation d’anticorps monoclonaux ou de lectines telles que Helix pomatia Des constructions gG- et gG- recombinantes ont été développées pour ces tests . La glycoprotéine G est maintenant disponible sur le marché sous forme de kit de Focus Technologies précédemment MRL Diagnostics et de Diagnology table Ces kits ont été approuvés par la FDA pour le diagnostic sérologique de l’herpès chez l’adulte et dans le cas des tests Focus pour la détection Les tests Focus comprennent une paire de kits ELISA ELISA enzymatiques ELISA et HerpeSelect-ELISA qui détectent les anticorps anti-gG- et gG-, respectivement. Les tests sont en format standard et contiennent des gV recombinants de bacculovirus. – HSV- ou gG- HSV- Bien que les bandes puissent être cassées pour les tests à faible volume, ces tests sont essentiellement destinés aux tests à haut débit et peuvent être exécutés sur un plateau automatisé. Le second test s’appelle HerpeSelect / Immunoblot et consiste en une seule bande de papier à laquelle ont été appliqués gG-, gG-, un antigène commun de type et une protéine témoin pour confirmer que le sérum a été ajouté. pour le test simultané des anticorps HSV et HSV. Ce test est plus cher que le test ELISA mais convient bien aux laboratoires de faible volume. Les tests de HerpeSelect ELISA ou immunoblot peuvent être commandés auprès du laboratoire de référence de Focus Technologies, ou les kits peuvent être achetés par d’autres laboratoires Des informations supplémentaires sur ces tests peuvent être trouvées sur http://www.focusanswerscom ou –

Tableau View largeTélécharger slideHerpes simplex virus Tests d’anticorps anti-HSV basés sur la glycoprotéine G, recommandé pour les tests d’anticorps anti-HSV spécifiques à un tableauTable AgrandirDiagnosticHerpes simplex virus Tests d’anticorps anti-HSV basés sur la glycoprotéine G, recommandé pour les tests d’anticorps anti-VHS spécifiques au type

Figure Vue largeDownload slideImmunoblots sont marqués comme réactifs si une bande glycoprotéine G-gG- et / ou gG- et la bande d’antigène commun HSV du virus de l’herpès simplex sont observées La bande de sérum anti-humain doit être observée pour que le test soit valideFigure View largeTélécharger slideImmunoblots sont notés comme réactifs si une bande de glycoprotéine G- gG- et / ou gG- et la bande d’antigène commun HSV du virus de l’herpès simplex sont observées La bande de sérum anti-humain doit être observée pour que le test soit valide. Le test de diagnostic POCkit-HSV- utilise gG- purifié à la lectine et un format de membrane à écoulement latéral qui permet de tester le sang capillaire d’un doigt dans le cadre de la clinique Ce format de point de service est conçu pour le test sanguin direct du patient, mais peut également être utilisé dans le laboratoire Diagnology cherche l’autorisation de la FDA d’un Clinical Laboratory Improvement Amendments-format renoncé pour le test qui permettra une utilisation plus large dans les cliniques et les bureaux qui n’ont pas de personnel qualifié POCkit-HSV- ne détecte que les anticorps anti-HSV, les patients atteints d’infection génitale à HSV ne seront pas identifiés par cette méthode. Des informations complémentaires sur POCkit-HSV- peuvent être trouvées sur http://wwwdiagnologycom ou –

ou échantillon de sérumFigure View largeTélécharger la diapositive Virus de l’herpès simplex au point de service de la magnétologie HSV- sérologie Ce kit de test est de la taille d’une carte de crédit et peut être exécuté dans & lt; La membrane de test contient un point glycoprotéine G-gG- purifiée à la lectine à droite et un réactif anticorps anti-humain à gauche. Un résultat de test positif avec changement de couleur rouge définitif. à la fois le point contenant le gG et les points de contrôle du sérum humain flèche Droite Un résultat de test négatif avec seulement le point de contrôle montrant un changement de couleur rouge Si aucun point ne devient coloré, le test est invalide et doit être répété avec un sang capillaire supplémentaire ou échantillons de sérumLes tests ELISA HSV gG et gG- développés par Gull Laboratories ont été les tests commerciaux les plus largement étudiés [, -] Les tests ont obtenu l’approbation de la FDA et ont été brièvement commercialisés sous les noms Premier HSV-ELISA IgG et Premier HSV-ELISA IgG. l’achat de Gull par Meridian Biosciences Meridian a récemment retiré ces tests du marché, et ils ne sont plus disponiblesQuidel Corporation a développé un test de membrane au point d’intervention pour les anticorps anti-HSV et HSV-  » QuickVue-HSV « Ce test n’est pas encore sur le marché. Deux autres tests basés sur gG ont été produits par Trinity Biotech Captia Select EIA, commercialisé par Wampole Laboratories et Roche Cobas Core HSV-IgG EIA, mais n’ont pas été revus par la FDA. Performances des tests glycoprotéiques G commerciaux Les tests Focus ELISA ont été testés contre Western blot dans des sérums non sélectionnés avec% de sensibilité et de spécificités de% HSV- et % HSV- Nous avons testé les Focus ELISA contre le Western blot dans les sérums des clients de la clinique STD de Seattle King County. Ce groupe présentait une séroprévalence à HSV et une séroprévalence à HSV de% par Western blot Sensibilité et spécificité de HerpeSelect – ELISA étaient chaque% dans ce groupe Sensibilité et spécificité de HerpeSelect-ELISA étaient% et%, respectivement RA, observations non publiées Un groupe de sérums de patients prénataux HSV- prévalence %; La sensibilité et la spécificité de HerpeSelect-ELISA étaient de% et% La sensibilité et la spécificité de HerpeSelect-ELISA étaient de% et%, respectivement Les données préliminaires suggèrent que les anticorps HSV et HSV- peuvent être détectés une médiane de – semaines après L’immunoblot Focus a également été testé dans les populations STD et prénatales et avait sensibilité et spécificité de% -% et% -%, respectivement, pour HSV – et la sensibilité et la spécificité de% -% et % -%, respectivement, pour les tests HSV-All Focus se sont bien comportés dans les tests de comparaison effectués au Central Public Health Laboratory CPHL à Londres en utilisant leur test de blocage des anticorps monoclonaux comme «gold standard» Le test POCkit-HSV- a été testé contre l’anticorps monoclonal CPHL bloquant ELISA et contre l’Université de Washington Western blot La sensibilité variait de% à% et la spécificité de% à% [,,] Nous avons également constaté qu’une médiane de POCkit-HSV- requiert seulement quelques semaines de début pour démontrer la séroconversion au HSV- La prudence est recommandée pour interpréter le test POCkit-HSV-, parce que la lecture d’un résultat positif peut être subjective Dans l’étude utilisant des sérums accumulés,% -% de tests ont été lus différemment par des lecteurs Le point de test devrait avoir un changement de couleur définitif au rose profond ou rouge pour être appelé figure positive Les tests sérologiques spécifiques au HSV qui sont disponibles dans le commerce mais non approuvés par la FDA ont des tests standards acceptés Cobas a une sensibilité de% et une spécificité de% lorsque la culture est utilisée comme marqueur d’infection et que les sérums pédiatriques sont présumés négatifs pour les calculs de spécificité Le HSV-EIA de Captia Select a été moins sensible% -% Spécificité Tests commerciaux qui ne sont pas basés sur la glycoprotéine G Des tests sérologiques fondés sur des préparations d’antigènes provenant de virus entiers ou de mélanges de protéines de cellules infectées brutes détectent principalement le type c Anticorps communs Bien que le problème le plus sérieux avec ces tests est leur incapacité à détecter les anticorps anti-HSV chez les patients séropositifs pour le HSV, les tests ont aussi des anticorps chez les patients ayant une infection uniquement par HSV ou HSV-, HSV- et HSV- partager la plupart de leurs séquences antigéniques; par conséquent, la plupart des anticorps anti-herpès sont «communs». Un certain nombre de sociétés offrent des tests basés sur la réactivité relative des anticorps sériques aux préparations brutes d’antigènes HSV et HSV. Ces tests sont décrits comme «spécifiques au type» dans la littérature marketing. ou fournir des instructions de kit pour déterminer HSV- contre HSV-anticorps Cependant, la précision des tests basés sur l’antigène brut pour la détection d’anticorps HSV est faible par rapport aux tests glycoprotéine G, et leur utilisation n’est pas recommandée tableau

Vue de la table largeTélécharger les diapositives basées sur l’antigène brut, ce qui n’est pas recommandé pour les tests spécifiques à un typeTable Voir les diapositives à télécharger volumineuses basées sur l’antigène brut, ce qui n’est pas recommandé pour les tests spécifiques au type

Utilisation clinique de sérologies HSV spécifiques au type

Une des principales raisons de l’absence de développement commercial du test HSV basé sur la glycoprotéine G a été la perception par les prestataires de soins de santé que chez un patient asymptomatique, le diagnostic d’infection par HSV est indésirable, car il peut avoir des séquelles psychosociales avantages Ce point de vue a été établi sur la base d’une abondante littérature qui montre une détresse psychosociale persistante chez certaines personnes diagnostiquées avec un herpès génital cliniquement évident Il y a une réticence générale à infliger à une personne en bonne santé un diagnostic de En outre, le conseil concernant l’herpès génital ne peut généralement pas être réalisé dans la courte période généralement prévue pour les visites de patients. Enfin, de nombreuses études ont documenté l’inconfort des prestataires de soins de santé à obtenir des informations sexuelles détaillées. l’histoire et de fournir des conseils sexuels à moindre risque Cependant, Il existe plusieurs situations dans lesquelles les sérologies spécifiques au type pour le diagnostic de l’infection à HSV et HSV sont potentiellement utiles et dans lesquelles l’acceptation de ces tests par les patients est élevée. Ces paramètres et l’interprétation des tests d’anticorps anti-VHS spécifiques au type sont revus ci-dessous

grossesse; Ainsi, il est probable que l’utilisation systématique des tests sérologiques HSV serait bien acceptée, comme cela a été le cas avec les tests VIH Une étude réalisée dans une clinique prénatale londonienne a montré que% des femmes envisageraient des tests d’anticorps anti-VHS. disponible sérologies HSV dans les cliniques STD Un autre contexte dans lequel les tests sérologiques sont susceptibles d’être utiles est celui des cliniques MST Les enquêtes sérologiques dans les cliniques MST ont montré que les taux d’infection HSV varient de% à%, selon le sexe et la race Comme dans la population générale, la plupart des patients ayant un anticorps anti-HSV observés dans les cliniques de MST n’ont pas d’antécédents d’herpès génital Il est important de noter qu’une proportion significative de patients -% dans le Seattle Clinique de MST-présentation pour les soins dans les cliniques de MST demande « écran STD » et ne pas avoir une plainte clinique spécifique M Golden, communication personnelle Ces patients sont généralement évalués pour l’inflammation des voies génitales, et sero Cependant, la norme actuelle de soins n’est pas d’effectuer une sérologie HSV, évitant ainsi de diagnostiquer une infection qui est certainement plus fréquente aux Etats-Unis que la syphilis insoupçonnée ou l’infection par le VIH. Les patients manifestent un intérêt considérable pour les tests sérologiques Par exemple, dans une clinique britannique de MST, plus de% des patients voulaient connaître leur statut en anticorps anti-HSV, et une proportion similaire souhaitait également que leurs partenaires soient testés. L’acceptation du test HSV dépend en partie du coût du test. Dans la clinique de Seattle contre les MST,% des patients ont accepté des tests sérologiques lorsqu’ils étaient offerts gratuitement dans le cadre d’un projet de recherche, par rapport à% de patients qui étaient d’accord quand il y avait une charge de $ pour le test D’autres corrélats statistiquement significatifs de l’acceptation des tests sérologiques HSV La plus grande différence dans l’acceptation du test gratuit versus payant était chez les Noirs:% consentaient quand le test était gratuit, comparé au% lorsque le test exigeait un paiement. Parmi les blancs, le taux d’acceptation était de% lorsque le test était Ces données suggèrent que la situation économique explique une grande partie de l’acceptation différentielle du test chez les patients en quête de soins pour MST Les questions budgétaires programmatiques ont été soulevées comme des obstacles à la disponibilité des tests sérologiques HSV dans les milieux de la MST Bien que les contraintes fiscales puissent vraiment interférer avec l’offre de ce test sans frais, comme avec d’autres tests traditionnels dans les cliniques STD, il ne devrait pas y avoir d’obstacles à la mise à disposition de ces tests à faible coût. Les cliniques de MST doivent être explicitement informées lorsque leur évaluation ne comprend pas de test de dépistage du VHS, car de nombreux patients ont l’impression qu’une co Une évaluation complète est systématiquement effectuée Sérologies HSV dans l’infection par le VIH De nombreuses études ont montré que l’infection par le HSV facilite l’acquisition du VIH, et certaines études suggèrent que le HSV a été étudié ailleurs. Les études d’histoire naturelle de l’infection par le VHS chez les personnes infectées par le VIH ont montré que le taux d’excrétion du VHS chez ces personnes est significativement plus élevé que chez les hommes immunocompétents et qu’une grande partie de l’excrétion chez les hommes ayant des rapports sexuels Cela suggère que cette population présente un risque plus élevé de transmission ultérieure du VHS au partenaire sexuel. Recommandations récentes des centres de contrôle et de prévention des maladies concernant le dépistage du VIH les personnes infectées pour les MST ne recommandent pas les tests sérologiques pour l’infection par le VHS Cependant, il semble que HSV-, en combinaison avec l’éducation et le conseil, et l’utilisation judicieuse d’agents antiviraux chez les personnes infectées à la fois par le VIH et le HSV est une approche raisonnable pour limiter la propagation des deux infections. HSV- augmentera le diagnostic de cette infection La difficulté de s’assurer que le test approprié est effectué est considérable, car ni les médecins ni les patients n’ont appris à demander des tests de marque. Cependant, seuls les tests glycoprotéine G ont une précision acceptable, bien que d’autres les tests restent sur le marché Plusieurs populations semblent appropriées pour le dépistage sérologique du VHS, y compris les femmes enceintes, les patients des dispensaires MST et les personnes infectées par le VIH. Les obstacles aux tests sérologiques pour le VHS comprennent des contraintes fiscales dans certains contextes et, au moins, réticence de la part des cliniciens à offrir le test que les patients sont de plus en plus susceptibles de demander